AMPK является важным ферментом, чувствительным к энергии, который контролирует энергетический статус клеток. В ответ на клеточные метаболические стрессы AMPK активируется и, таким образом, фосфорилирует и инактивирует ацетил-КоА-карбоксилазу (ACC) и бета-гидрокси-бета-метилглутарил-КоА-редуктазу (HMGCR), ключевые ферменты, участвующие в регуляции биосинтеза de novo жирных кислот и холестерина. Эта субъединица может быть положительным регулятором активности AMPK. Было показано, что миристоилирование и фосфорилирование этой субъединицы влияет на активность фермента и клеточную локализацию AMPK. Эта субъединица может также служить адапторной молекулой, опосредующей ассоциацию комплекса AMPK.
Вестерн-блоттинг экстрактов различных клеточных линий с использованием антитела AMPKβ1 (A12491) в разведении 1:1000:
- Вторичное антитело: HRP Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (AS014) в разведении 1:10000.
- Лизаты/белки: 25 мкг на дорожку.
- Блокирующий буфер: 3% обезжиренное сухое молоко в TBST.
- Обнаружение: базовый комплект ECL (RM00020).
- Время экспозиции: 90 c.
Вестерн-блот-анализ экстрактов нормальных (контрольных) и клеток HeLa с нокаутом AMPKβ1 (KO) с использованием антитела AMPKβ1 (A12491) в разведении 1:1000:
- Вторичное антитело: HRP Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (AS014) в разведении 1:10000.
- Лизаты/белки: 25 мкг на дорожку.
- Блокирующий буфер: 3% обезжиренное сухое молоко в TBST.
- Обнаружение: базовый комплект ECL (RM00020).
- Время экспозиции: 5 с.
