Кодируемый белок необходим для правильной убиквитинирующей функции APC/C и для взаимодействия APC/C с коактиваторами транскрипции. Он также взаимодействует с полиА-связывающим белком и подавляет трансляцию, опосредованную внутренним сайтом посадки рибосомы. Для этого гена было обнаружено несколько вариантов транскриптов, кодирующих разные изоформы. Эти различия вызывают инициацию трансляции в нижестоящей AUG и приводят к более короткому белку (изоформа b) по сравнению с изоформой a.
Вестерн-блот анализ экстрактов различных клеточных линий с использованием антитела ANAPC5 (A7109) в разведении 1:1000:
- Вторичное антитело: HRP Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (AS014) в разведении 1:10000.
- Лизаты/белки: 25 мкг на дорожку.
- Блокирующий буфер: 3% обезжиренное сухое молоко в TBST.
- Обнаружение: базовый комплект ECL (RM00020).
- Время экспозиции: 90 c.
Вестерн-блот-анализ экстрактов нормальных (контрольных) и клеток с нокаутом ANAPC5 (KO) 293T с использованием антитела ANAPC5 (A7109) в разведении 1:1000:
- Вторичное антитело: HRP Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (AS014) в разведении 1:10000.
- Лизаты/белки: 25 мкг на дорожку.
- Блокирующий буфер: 3% обезжиренное сухое молоко в TBST.
- Обнаружение: базовый комплект ECL (RM00020).
- Время экспозиции: 30 с.
