AP-сайты представляют собой премутагенные повреждения, которые могут препятствовать нормальной репликации ДНК, поэтому клетка содержит системы для идентификации и восстановления таких сайтов. Эндонуклеазы AP класса II расщепляют 5′-фосфодиэфирный остов до AP-сайта. Этот ген кодирует основную эндонуклеазу АР в клетках человека. Для этого гена были обнаружены варианты сплайсинга; все кодируют один и тот же белок.
Вестерн-блот-анализ экстрактов различных клеточных линий с использованием антитела APEX1/APE1 (A2587):
- Вторичное антитело: HRP Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (AS014) в разведении 1:10000.
- Лизаты/белки: 25 мкг на дорожку.
- Блокирующий буфер: 3% обезжиренное сухое молоко в TBST.
Вестерн-блот-анализ экстрактов нормальных (контрольных) и клеток с нокаутом APEX1/APE1 (KO) 293T с использованием антитела APEX1/APE1 (A2587) в разведении 1:3000:
- Вторичное антитело: HRP Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (AS014) в разведении 1:10000.
- Лизаты/белки: 25 мкг на дорожку.
- Блокирующий буфер: 3% обезжиренное сухое молоко в TBST.
- Обнаружение: базовый комплект ECL (RM00020).
- Время экспозиции: 1 c.
