Набор для мультиплексного обнаружения РНК SARS-CoV-2 и E484Q/P681R предназначен для качественного обнаружения РНК SARS-CoV-2 и мутанта E484Q/P681R в гене S SARS-CoV-2 методом обратной транскрипции в реальном времени. Метод полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР в реальном времени).
Тест предназначен для обнаружения РНК SARS-CoV-2 и мутанта E484Q/P681R в гене S SARS-CoV-2 в таких образцах, как мазки из носоглотки или ротоглотки, собранные у отдельных сотрудников на основе клинических и/или эпидемиологических критериев. Другие типы проб из верхних и нижних дыхательных путей (такие как мокрота, аспираты нижних дыхательных путей, бронхоальвеолярный лаваж и смывы из носоглотки/аспират или аспират из носа), а также пробы, собранные из окружающей среды, могут служить целям обнаружения вируса, например, если из образцов можно будет извлечь достаточную РНК SARS-CoV-2 и мутант E484Q/P681R в гене S SARS-CoV-2. Потенциальный кандидатский персонал, подлежащий тестированию, может включать, помимо прочего, пациентов с симптомами инфекции, у которых поставщики медицинских услуг подозревают наличие COVID-19.
Принципы анализа:
Анализ предназначен для воздействия на хорошо консервативные области генов белков N, сайты мутаций E484Q и P681R в гене S. Разработан набор специфических праймеров и зондов, различные флуорофорные метки используются для мультиплексного обнаружения гена N и сайтов мутаций E484Q и P681R в гене S. Нуклеиновые кислоты экстрагируются из определенных образцов с использованием адекватных методов и материалов. После обратной транскрипции представленные целевые последовательности будут амплифицированы с помощью соответствующих специфических праймеров и обнаружены с помощью зондов TaqMan. Во время фазы продления каждого цикла ПЦР полимераза Taq отщепляет репортерный краситель от 5′-конца зонда, отделяет краситель от тушителя, создавая флуоресцентные сигналы. Нарастающие сигналы флуоресценции обнаруживаются в ходе ПЦР и анализируются данные.
Специальный набор праймеров и зондов разработан для человеческого гена «домашнего хозяйства» GAPD, который служит внутренним контролем (IC) для этого анализа. GAPD последовательно экспрессируется в клетках человека, которые присутствуют в образцах, предназначенных для анализа. Возникновение ложноотрицательных результатов из-за проблем с качеством проб и/или процессом экстракции можно эффективно отслеживать и контролировать.
Хранение, транспортировка и обращение с реагентами:
Все реагенты следует хранить при температуре от -25°C до -15°C в незамерзающей морозильной камере до истечения срока годности. За период использования набора следует избегать замораживания/размораживания более трех раз. Реагенты следует транспортировать при температуре от -25°С до 8°С.
