АМИНОКИСЛОТНЫЙ АНАЛИЗАТОР АКА-1000 НА БАЗЕ ЖИДКОСТНОГО ХРОМАТОГРАФА «СКОРОХОД»

Аминокислотный анализ широко применяется в лабораторной практике различного профиля, что и неудивительно, ведь аминокислоты являются строительным материалом для белков и основой нормального углеводного и липидного обмена. Ниже приведены наиболее распространенные объекты исследований, для которых аминокислотный анализ незаменим и несет ценнейшую информацию.

Информационная поддержка По всем возникающим вопросам

Сервисное обслуживание Диагностика, калибровка, поверка, расходные материалы

Доставка по РФ Транспортная компания, самовывоз, транспорт нашей компании

  • Продукты питания, напитки, корма и комбикорма
    Качественный и количественный состав аминокислот определяет ценность продуктов питания и кормов, помогает скорректировать рацион в случае необходимости.
  • Лекарственные препараты
    Качественный и количественный состав аминокислот в белковых, пептидных и других фармацевтических препаратах позволяет установить их подлинность. Кроме того, аминокислотный анализ может быть использован в качестве дополнительного инструмента при анализе структуры белка и пептида, а также для оценки стратегий фрагментации в пептидном картировании и для обнаружения атипичных аминокислот, которые могут присутствовать в белке или пептиде (ОФС.1.2.1.0025.18).
  • Биологические жидкости
    Уровень аминокислот в крови и их производных позволяет оценить состояние аминокислотного обмена, диагностировать или подтвердить нарушение обмена аминокислот и ряд других заболеваний, связанных с их метаболизмом.

ПОЧЕМУ «ПОСТКОЛОНКА»?

Как известно, анализ аминокислот (АК) методом ВЭЖХ проводят с использованием методов предколоночной или постколоночной дериватизации, так как сами по себе они не поглощают свет в УФ – и видимой области спектра. Аминокислотный анализатор от компании Sevko&Co применяет подход постколоночной дериватизации как метода, имеющего ряд преимуществ в точности и стабильности получаемых результатов вне зависимости от сложности (загрязненности) матрицы, концентрации гидролизованного белка, при этом, что немаловажно, полностью автоматизированного. Посмотрим на сравнительную таблицу ниже, чтобы убедиться в приведенном тезисе.

Предколоночная дериватизация Постколоночная дериватизация
  • обращено-фазовый механизм разделения
  • ионообменный механизм разделения
  • разделяются дериваты АК
  • разделяются чистые АК
  • сильное влияние матрицы на результаты анализа (образование побочных дериватов, конкурирующие реакции, ингибирование основной реакции): сниженная точность анализа и воспроизводимость по времени удерживания и площади пиков
  • влияние матрицы отсутствует, так как ее компоненты не удерживаются на сорбенте
  • нестойкость дериватов, полученных при помощи ортофталевого реагента (особенно влияет на воспроизводимость наиболее

 удерживаемых АК: лизин,       гистидин триптофан, аргинин и т.д.)

  • не имеет значения, так как дериваты мгновенно поступают на детектор, а не через ≈ 45 мин, как в методе с предколоночной дериватизацией. Кроме того, вся система инертизирована
  • невозможность получения стабильных количественных результатов
  • воспроизводимые результаты определения всех АК
  • быстрая деградация ортофталевого реагента: необходимость готовить его каждый день заново
  • стабильность дериватизующих реагентов вне зависимости от их природы: нингидрин или ортофталевый реагент, так как вся система инертизирована
  • отсутствие возможности автоматизации при использовании фенилизотиоцианата в качестве дериватизующего агента. Ручная подготовка пробы: нагрев, высушивание досуха и перерастворение
  • полная автоматизация процесса вне зависимости от используемого дериватизующего агента: нингидрина или ортофталевого реагента

Благодаря указанным преимуществам метода в Европе именно постколоночная дериватизация является «золотым стандартом» при анализе АК и используется в качестве поточного метода, а не от случая к случаю, если нужно провести единичный анализ, как предколоночная дериватизация.

Аминокислотный анализатор АКА-1000, как и вся продукция компании Sevko&Co, производится на собственных мощностях компании на площадке в Подмосковье по полному циклу. Аминокислотный анализатор представляет из себя жидкостной хроматограф «Скороход», в котором все детали и механизмы, соприкасающиеся с подвижной фазой и пробой, выполнены из инертных материалов (ПЭЭК, ПТФЭ, сапфир), что позволяет использовать высокосолевые буферы в качестве подвижной фазы, причем в приборе отсутствуют компоненты из западных стран, что обеспечивает:

  • быстрые сроки производства и поставки (60 календарных дней);
  • стабильность и ритмичность производственного процесса;
  • независимость от санкционного давления третьих стран;
  • расширенный гарантийный период (2 года).

Аминокислотный анализатор АКА-1000это законченное решение для анализа аминокислот, которое готово к работе сразу из коробки. В комплект анализатора входят все необходимые реактивы на 500 анализов, приготовленные в лаборатории компании Sevko&Co, а также колонки собственного производства:

  • Буфер А1 – Na+/Li+ система
  • Буфер В1 – Na+/Li+ система
  • Буфер С1 – только Li+ система
  • Раствор для регенерации
  • Раствор для разбавления образцов
  • Нингидриновый реагент
  • Стандартная смесь аминокислот для построения калибровки
  • Аналитическая колонка с ионообменной смолой, в Na+ форме, 150 х 4,6 мм, 7 мкм для анализа до 20-ти основных аминокислот. Эту колонку обычно применяют при анализе гидролизатов белков в простых матрицах: кормах и комбикормах, фармпрепаратах.

или

  • Аналитическая колонка с ионообменной смолой, в Li+ форме, 150 х 4,6 мм, 7 мкм для анализа до 50-ти аминокислот. Эту колонку обычно применяют при проведении анализа в сложных матрицах: биологических жидкостях, экстрактах из растений, пищевых продуктах и напитках.
  • Фильтр-ловушка для аммиака
  • Постановка методики на вашей площадке
  • Методическая и сервисная поддержка в течение всего жизненного цикла анализатора от Производителя в РФ

Классическая конфигурация анализатора снабжена спектрофотометрическим детектором с двумя фиксированными длинами волн (440 и 570 нм) и светодиодами в качестве источника излучения, а также модулем постколоночной дериватизации, представляющем из себя стандартный модуль из серии «Скороход», в который интегрированы термостат колонок, насос для подачи нингидринового реагента, а также высокотемпературный реактор. При этом, модуль постколоночной дериватизации автономен и может быть сочленен с абсолютно любой ВЭЖХ-системой. Эта разработка компании Sevko&Co имеет более чем десятилетний опыт успешного применения по всей России и странам ближнего зарубежья и явилась первым модулем, выпущенным компанией на рынок в 2013 г. и заложившим фундамент всему многообразию ВЭЖХ из серии «Скороход».

Альтернативная конфигурация анализатора предполагает использование флуориметрического детектора со светодиодными источниками излучения и ортофталевого дериватизующего реагента, позволяющего определять аминокислоты в меньших концентрациях. В качестве узла для ввода пробы можно использовать как автодозатор, так и ручной инжектор для лабораторий с малым объёмом проб.

В обоих конфигурациях используются светодиодные детекторы, имеющие ряд серьезных эксплуатационных преимуществ.

    • Специфичная длина волны в отличие от ламп широкого спектра,
    • Более высокая светоотдача по сравнению с лампами широкого спектра,
    • Более высокая стабильность излучения, чем у ламп широкого спектра,
  • Более низкие пределы обнаружения
  • Не требуют прогрева перед применением,
  • Служат в разы больше ламп широкого спектра, практически вечные, отсюда — существенная экономия ресурсов на обслуживание,
  • Гораздо более низкая стоимость детектора без компромиссов с чувствительностью: не требуется монохроматора, фильтров, источник питания для светодиодов дешевле.

 

ЕЩЕ БОЛЬШЕ ТЕХНИЧЕСКИХ РЕШЕНИЙ ДЛЯ УВЕРЕННОСТИ В РЕЗУЛЬТАТАХ АНАЛИЗА

Безспульсационные насосы для подачи реагента и элюента

Последовательный плунжерный механизм для беспрерывной подачи реагентов, исключающей нестабильность и пульсации насоса. Благодаря высокой частоте и малому ходу (8 мкл) плунжеров вклад в пульсации системы отсутствует в отличие от традиционных длинноходовых насосов.

 

Производительность и высочайшая точность дозирования

Уникальный для российского рынка автодозатор прямого дозирования пробы из иглы («split-loop»), обладающий высоким быстродействием (один цикл дозирования пробы с промывкой иглы до и после анализа составляет лишь 50 с) и вместимостью (153 х 2 мл) увеличивает производительность лаборатории кратно по сравнению с автодозаторами аспирационного типа («pulled-loop»). Высочайшая точность ввода пробы обеспечивается дозирующим насосом с шаговым двигателем разрешением 0,08 мкл на 1 шаг. Учитывая, что он используется в режиме деления шага 1 к 16, то дискретность дозирования получается равной всего-навсего 0,005 мкл, что позволяет дозировать объемы во всем диапазоне от 0,1 до 100 мкл с шагом 0,01 мкл точно и воспроизводимо.

 

Нулевой кросс-перенос и потери пробы

Нулевой кросс-перенос обеспечивается проточным дизайном иглы, отсутствием лишних элементов в конструкции (инжекционный порт и дозирующий кран совмещены: отсутствует трансферная линия, нет буферной трубки в отличие от автодозаторов типа «pulled-loop»), а также активной промывкой внешней поверхности иглы. Внутренняя поверхность иглы непрерывно промывается подвижной фазой. Дозируется строго ваш аналитический объем. Нет потерь пробы, как в автодозаторах типа «pulled-loop», на заполнение длинной буферной трубки.

 

Большие сенсорные экраны на каждом модуле

Позволяют отслеживать текущие и установленные параметры системы, производить автоматическую промывку жидкостных линий, экстренно выключать систему в случае возникновения внештатных ситуаций. Интуитивно понятная цветовая кодировка и возможность работы в перчатках делают повседневные операции комфортными и удобными для пользователя.

 

Инертизация всей системы

Дериватизующие реагенты, а также буферы, как и все жидкостные линии системы, находятся под подушкой инертного газа (N2), что позволяет избежать окислительной деструкции и загрязнения реагентов. Лоток для бутылей с системой подачи инертного газа снабжен регулятором давления, а также специальными крышками с клапанами, которые позволяют поддерживать давление газа в системе.

 

Высокотемпературный реактор

Регулируемая температура реактора от 50 до 150 °С с катушкой-капилляром длиной до 30 м для проведения реакции дериватизации. Автоматическая промывка капилляра после каждой инжекции предотвращает его закупорку. Защита от перегрева и мониторинг давления в режиме реального времени позволяют проводить реакцию при высоких температурах.

Интегрированный в насос или модуль для постколоночной дериватизации термостат колонок

Диапазон контролируемых температур термостата (от комнатной -10) до +99 ℃ позволяет поддерживать высокие температуры, необходимые для анализа аминокислот, с высокой точностью (±0.5 ℃) и стабильностью (±0.1 ℃).

 

Развитая система безопасности

  • датчики течи во всех модулях системы;
  • датчик открытия двери (с блокировкой движения манипулятора с иглой) в автодозаторе гарантирует отсутствие травм оператора;
  • датчик распознавания типа планшета и его наличия предохраняет иглу от повреждений и препятствует неправильной установке планшета;
  • датчик отсутствия виалы; 
  • система защиты иглы от излома в автодозаторе в случае сбоя центровки иглы;
  • датчики давления в насосах для подачи элюента и реагента для защиты от выхода за границы пороговых значений давления.

 

ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ КОМПОНЕНТОВ СИСТЕМЫ

Хроматографический насос НЖХ-1000АГ4(Т)И

  • Максимальное рабочее давление: 35 МПа
  • Двухплунжерный последовательный механизм
  • Исполнение: ПЭЭК
  • Диапазон задаваемой скорости потока: 0,001 – 10 мл/мин
  • Повторяемость потока подвижной фазы (ОСКО): 0,06 %
  • Точность потока подвижной фазы: 0,15 %
  • Рабочий диапазон pH: 1-14
  • Пульсации давления: ≤ 1 %
  • Встроенный клапан на 4 компонента* для создания градиента на стороне низкого давления
  • Датчик течи, защита от выхода за пределы верхней и нижней границы давления системы
  • Встроенная система промывки плунжерного пространства

*Про запросу возможно исполнение для создания бинарного градиента на стороне высокого давления

Интегрированный в насос или модуль постколоночной дериватизации термостат колонок

  • Максимальная вместимость: 4 колонки длиной до 300 мм;
  • Диапазон поддерживаемых температур: (от комнатной -10) до +99 ℃
  • Точность поддержания температуры: ±0.5 ℃
  • Стабильность поддержания температуры: ±0.1 ℃
  • Датчик течи

Интегрированный спектрофотометрический детектор ФФД-1000 с фиксированными длинами волн

  • Диапазон длин волн: 265 – 900 нм
  • Фиксированные длины волн: 440 и 570 нм
  • Линейный динамический диапазон: до 2,5 ед. абс.
  • Источники излучения: светодиоды
  • Встроенная кювета: 10 мм, 12 мкл (ПЭЭК)
  • Частота опроса сигнала: 100 Гц
  • Опция: возможность установки микроячеек с длиной оптического пути < 10 мм

Модуль постколоночной дериватизации АРМ-1000Н(T)

  • Исполнение «Н» для реакции с нингидрином (реакционный капилляр 16 метров)
  • Максимальное рабочее давление дозирующего насоса: 35 МПа
  • Исполнение: ПЭЭК
  • Двухплунжерный последовательный механизм
  • Диапазон задаваемой скорости потока: 0,001 – 4 мл/мин
  • Диапазон поддерживаемой температуры реактора: от 50 до 150 ℃
  • Шаг температуры: 1 ℃
  • Защита от перегрева
  • Мониторинг давления

 

Лоток для бутылей с системой подачи инертного газа

  • 4 бутыли объемом 1 л в комплекте
  • 4 крышки для бутылей для поддержания избыточного давления в системе в комплекте
  • Регулятор давления для подачи инертного газа
  • Манометр для измерения избыточного давления в режиме реального времени

 

Автоматический дозатор образцов АДХ-1000И

  • Автодозатор прямого дозирования пробы из иглы «(split-loop)»
  • Максимальное рабочее давление: 35 МПа
  • Исполнение: ПЭЭК
  • Диапазон объема вводимой пробы: 0,1 – 100 мкл
  • Стандартный планшет для виал объемом 2 мл: 153 шт.
  • Уровень перекрестного загрязнения пробы: не более 0,002 %
  • Промывка иглы внутри и снаружи
  • Время одного цикла инжекции (с промывками): 50 с
  • Рабочий диапазон pH: 1-14
  • Датчик течи, датчик отсутствующей виалы, датчик открытия двери (с блокировкой движения манипулятора с иглой), система защиты иглы от изгиба или излома, датчик распознавания типа держателя виал и его наличия
  • 100 виал х 2 мл с крышками и септами в комплекте
  • Опция: возможность увеличения объема вводимой пробы до 2 500 мкл
  • Опция: возможность работы с микротитрационными и глубоколуночными планшетами (3 х 96 шт).

АЛЬТЕРНАТИВНЫЕ ПРИМЕНЕНИЯ ПОСТКОЛОНОЧНОЙ ДЕРИВАТИЗАЦИИ

Постколоночная дериватизация является эффективным и распространенным методом не только для определения АК, например, в полном соответствии с ГОСТ 32195-2013 (ISO13903:2005), ГОСТ 33428-2015, ГОСТ 54743-2011, ГОСТ 32799-2014, ГОСТ Р 59296-2021, но и для широкого ряда соединений, которые сложно достоверно определить в малых концентрациях без использования цветных реакций. Ниже приведен список основных аналитов, для которых можно использовать АКА-1000 с незначительными модификациями.

  • Биогенные амины
  • Редуцирующие и фосфорилированные редуцирующие сахара
  • Анионы переходных и тяжелых металлов
  • Монензин, наразин и салиномицин
  • Мадурамицин аммония
  • Семдурамицин натрия
  • Гидрат гадодиамида
  • Водорастворимые витамины B1, B2, B6 (ГОСТ 32903-2014)
  • Афлатоксин B1 (ГОСТ 32251-2013)
  • Сумма фумонизинов B1 и B2

 

Если вы не нашли в списке интересующих вас соединений, обратитесь к вашему менеджеру. Мы обязательно адаптируем анализатор для решения именно вашей аналитической задачи.

 

Мы предлагаем бесплатно

  • Апробацию прибора в лаборатории
  • Предварительную постановку/адаптацию методики на базе лаборатории в Москве
  • Посещение производства в Подмосковье
  • Методическую и сервисную поддержку
  • Гарантию на прибор — 2 года